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产品名称:SYBR Green I (PCR级,10000X)

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产品特点:SYBR Green I 染料是一种直接与双链 DNA (dsDNA) 结合的荧光染料,是荧光定量PCR Z常用的DNA结合染料。在定量 PCR中,SYBR Green I可与双链DNA(dsDNA)非特异性结合后发出荧光,则可以通过检测反应体系中的SYBR Green I 荧光强度,达到检测PCR 产物扩增量的目的。SYBR Green I (PCR级,10000X)

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SYBR Green I (PCR级,10000X)的详细资料:

SYBR Green I (PCR级,10000X)

规格:50/100ul

保存:-20℃避光保存,有效期至少一年。

产品说明:

SYBR Green I 染料是一种直接与双链 DNA (dsDNA) 结合的荧光染料,是荧光定量PCR zui常用的DNA结合染料。在定量 PCR中,SYBR Green I可与双链DNA(dsDNA)非特异性结合后发出荧光,则可以通过检测反应体系中的SYBR Green I 荧光强度,达到检测PCR 产物扩增量的目的。游离状态下,SYBR  Green I发出微弱的荧光,一旦与dsDNA结合,其荧光增加1000倍,一个反应发出的全部荧光信号与出现的dsDNA量成比例,且会随扩增产物的增加而增加;所以通过检测PCR 反应液中的荧光信号强度,可以对目的基因进行准确定量,同时还可以测定扩增的目的DNA片段的熔解温度。

SYBR Green I (PCR级,10000X)使用说明:

使用时,配置PCR反应混合液,将10000×SYBR Green I浓缩液加入到PCR反应体系,使终浓度为0.5× (0.2×到1×之间调整)。以上操作建议在冰上进行。

注:①反应液配制方法和PCR 扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明。 

②Realtime PCR 扩增仪的使用方法,请参照各仪器说明书。

注意事项:

使用浓度对荧光PCR结果的影响 

SYBR Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低,这就意味着低拷贝的样品可能无法检出;而在高浓度时,将会抑制PCR反应,降低PCR反应效率。所以一般在使用SYBR Green I时应根据实际情况优化使用浓度,反应的终浓度为0.2×到1×之间。 

镁离子浓度的影响 

提高镁离子浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。我们建议在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时,镁离子浓度比无SYBR Green I 的普通 PCR 反应高出0.5~3mM。

SYBR Green I (PCR级,10000X)

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